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人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)條件：1、合適的小鼠源細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長增殖的重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2、優(yōu)質(zhì)血清目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中重要的成分之一，含有細(xì)胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分。3、無菌無毒細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細(xì)胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。在體外培養(yǎng)的細(xì)胞由于缺乏對(duì)微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物...

聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（Polymerasechainraction,PCR）是一種在體外擴(kuò)增特定DNA片段的方法，具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn)，可用很短時(shí)間使目的基因或某一片段擴(kuò)增十萬乃至幾百萬倍。PCR反應(yīng)基本步驟：1、變性：根據(jù)DNA高溫變性的原理，將反應(yīng)體系溫度升至變性溫度（高于模板熔點(diǎn)，約95℃），使目的DNA雙鏈裂解成PCR模板（單鏈）。[95℃，30s]2、退火：將反應(yīng)體系溫度驟降至退火溫度（低于引物熔點(diǎn)約55℃），是PCR引物與P...

影響抗原抗體反應(yīng)的兩個(gè)因素：1、反應(yīng)物自身的因素抗體：不同來源的抗體,反應(yīng)性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗(yàn)的可靠性,應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價(jià)帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng).抗原：抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果.顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價(jià)抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象.2、反應(yīng)環(huán)境條件酸堿度：抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進(jìn)行...

在培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中，難免培養(yǎng)的細(xì)胞被污染了，得不到想要的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，那么你知道細(xì)胞培養(yǎng)的污染來源有哪些嗎？細(xì)胞培養(yǎng)過程中污染的來源主要有以下幾條途徑：一、不潔的動(dòng)物組織標(biāo)本很多動(dòng)物組織本該是無菌的(直接與外界相通的呼吸道和消化道、泌尿系統(tǒng)除外)，但由于取材時(shí)不小心也會(huì)有污染的機(jī)會(huì)。組織本身含有細(xì)菌，如取材時(shí)不用濃的抗生素洗液洗滌浸泡，也會(huì)帶菌，造成細(xì)胞污染。二、空氣空氣中含有大量的微生物，如果操作室與外界隔離不嚴(yán)或消毒不充分下，很容易造成污染。另外，凈化工作臺(tái)使用過久，濾板未定...

抗體保存溫度和條件抗體的保存方法一般會(huì)直接影響抗體的活性和使用效果。在保存得當(dāng)?shù)那闆r下，大部分抗體可以存放數(shù)月甚至數(shù)年，一般情況需嚴(yán)格按照抗體說明書來進(jìn)行保存。抗體保存溫度和條件:1、抗體收到后，需在12000rpm離心1~5分鐘，再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存，如果抗體體積不足50ul，可延長離心時(shí)間至5分鐘，從而確保抗體全部離心下來。2、對(duì)于多數(shù)抗體而言，分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是zuijia選擇。腹水形式的產(chǎn)品收到后需立即凍存，因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶，長期...

ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體（captureAb）固定在固相載體上，再加入一級(jí)檢測(cè)抗體（primarydetectionAb），形成一個(gè)抗原抗體的復(fù)合物。如果該抗體已經(jīng)用酶（enzyme）標(biāo)記了，即可用來直接測(cè)定抗原的量，若無，則可利用另一個(gè)酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來測(cè)定抗原的量。測(cè)定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)（substrate），作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關(guān)系，依此原理計(jì)算出樣本中的抗原總量...

佰利萊生物為您講解PCR反應(yīng)效率低值解析反應(yīng)效率視為實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析設(shè)計(jì)和優(yōu)化的關(guān)鍵因素。利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(通過對(duì)目標(biāo)模板進(jìn)行連續(xù)梯度稀釋獲得)獲取效率值。該效率值可作為總反應(yīng)的“健康”標(biāo)志。低效率與高效率所造成的影響有所不同。改善上述兩種情形的步驟則相差甚遠(yuǎn)。理想的反應(yīng)效率為100%，但反應(yīng)效率在90–110%范圍內(nèi)都是可以接受的。確定某個(gè)特定的分析效率是否低下的方法是稀釋模板生成標(biāo)準(zhǔn)曲線(模板稀釋的范圍應(yīng)涵蓋所有未知樣本)，然后查看該范圍內(nèi)的效率。它應(yīng)盡可能接近100%...

ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)溫育解讀在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加酶結(jié)合物和顯色劑后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育。溫育的時(shí)間選擇:溫育這一步是ELISA測(cè)定中最容易出現(xiàn)問題的步驟。目前國內(nèi)ELISA試劑盒的反應(yīng)溫育時(shí)間為37℃30分鐘-1小時(shí)，進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃1-2小時(shí)才能有較wan全的結(jié)合，低于1小時(shí)，可能會(huì)影響測(cè)定下限。ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表...

ELISA試劑盒結(jié)果判定：1、結(jié)果的判定嚴(yán)格依據(jù)試劑盒提供的陽性判定值（CO）進(jìn)行結(jié)果判定。廠商提供試劑的同時(shí)，說明書上列出的CO值是建立在一系列科學(xué)試驗(yàn)及統(tǒng)計(jì)研究的基礎(chǔ)上，不應(yīng)隨意更改。定量測(cè)定需要制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算結(jié)果。2、灰區(qū)的設(shè)置通常情況下ELISA結(jié)果報(bào)告方式為“陰性"或“陽性"，在二者之間有一條明確的分界線，也就是所謂的陽性判定值即CO值，對(duì)于樣本的吸光度值（A）高于CO值就判斷為陽性，相反則判斷為陰性，然而在實(shí)際工作中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)樣本A值位于CO值附近...

細(xì)胞是生命的基本單位。（除了病毒外。）細(xì)胞由細(xì)胞核組成和細(xì)胞膜還有線粒體等組成。（除個(gè)別生物）小到細(xì)菌大至鯨魚。都由細(xì)胞組成。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)用技巧總括:1.買細(xì)胞要去正規(guī)的地方購買，一般產(chǎn)品資料上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的詳細(xì)介紹，這樣在培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。2.不管是買的細(xì)胞，還是他人惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手需要趕緊做的兩件事：一檢測(cè)是否有支原體污染;二迅速擴(kuò)增凍存，凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。3.發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)養(yǎng)了很多種細(xì)胞...